ELISA - Enzymbundet Immunosorbentassay: Transkript

2023 Forfatter: Riley Dean | [email protected]. Sidst ændret: 2023-11-27 09:15

Diagnosemetoden (ELISA) er informativ og ikke for dyr, derfor tilbyder mange laboratorier deres klienter denne metode (enzymbundet immunosorbentassay). Undersøgelsen udføres på tom mave, blod til analyse udtages fra patientens cubital vene. Det tilrådes ikke at ryge eller drikke alkohol før ELISA.

Indholdet af artiklen:

1 Hvad er en ELISA-blodprøve
2 Hvad er immunoglobuliner
3 Hvordan blod ELISA udføres
4 Immunoassay mod parasitter af ELISA
5 Hvordan ELISA bruges
6 Tests til immunologisk blodanalyse af ELISA
7 Omfang af immunologisk analyse af blod ved ELISA
8 Indikationer for brug og opdagede sygdomme af ELISA
9 Fordele ved ELISA-metoden
10 Ulemper ved ELISA-metoden
11 mulige ELISA-resultater

Hvad er en ELISA-blodprøve

Blandt metoderne til blodanalyse, der tillader vurdering af kroppens evne til at modstå infektionssygdomme og viser sygdommens fase, indtager enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) et vigtigt sted. Denne undersøgelse gør det muligt at uddybe aktiviteten for blodets beskyttelsesfunktion og identificere immunsvigtstilstanden i infektiøse patologier såvel som blodsygdomme, autoimmune processer, hormonelle problemer.

Dette er en laboratorieundersøgelse, der giver dig mulighed for at bestemme tilstedeværelsen af specifikke antistoffer (beskyttelsesfaktorer i blod af proteinkarakter) over for visse antigener (patogene stoffer). Blandt antistoffer er immunoglobuliner, der kan eksistere i form af immunkomplekser, af største betydning.

Immunoglobuliner produceres som et resultat af komplekse neurohumorale reaktioner af human immunitet, der opstår som et svar på introduktionen af fremmede antigener. For hver type patogent middel produceres dets egne specifikke antistoffer. De virker ved at "binde" et antigen eller en patologisk mikroorganisme og danner en kompleks forbindelse "antigen-antistof" med efterfølgende neutralisering, enzymatisk lysering, fagocytosereaktioner og tilbagetrækning fra kroppen Det er ved tilstedeværelsen af visse komplekser, at ELISA-metoden bestemmer typen af patogen eller et skadeligt stof, der er til stede i patienten.

På grund af den lave pris og brug af blod som biomateriale bruges metoden som en screeningsmetode. Hvis der f.eks. Er mistanke om parasitose, donerer patienter blod for at bestemme antistoffer mod rundorm, lamblia osv. Hvis resultatet er positivt, skal du ikke straks begynde at behandle parasitter - du skal sammenligne det kliniske billede, resultaterne af ELISA og muligvis resultaterne af andre undersøgelsesmetoder.

Det er værd at huske, at efter det afsluttede behandlingsforløb kan antistoffer forblive i vores krop i meget lang tid, selv efter at infektionen har forladt vores krop, dvs. det såkaldte "serologiske ar" forbliver. For eksempel er der tusinder af stjerner på nattehimlen. Mange af disse stjerner er længe siden døde, men deres lys har skinnet indtil nu i århundreder. Faktisk ser vi kun en stjernespor. Der er lys, men stjernen er længe væk.

Men hvis der ikke er noget lys, betyder det ikke, at stjernen ikke var der. Det er det samme med antistoffer. Deres tilstedeværelse garanterer ikke tilstedeværelsen af det ønskede infektionsmiddel i kroppen. Fraværet af antistoffer betyder ikke, at der ikke er nogen infektion. Hvis resultatet af analysen fra ELISA er positivt, betyder det, at du skal kigge efter en infektion med mere specifikke og dyre metoder - PCR, bakteriologiske kulturer. Et falskt positivt resultat er muligt, hvis flere mikrober har en lignende antigenisk struktur, vil "lignende" antistoffer blive produceret til forskellige mikrober.

Hvad er immunoglobuliner

5 hovedklasser af immunoglobuliner er blevet opdaget og undersøgt - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. resten af rollen er endnu ikke blevet belyst fuldt ud, og den er på stadiet af videnskabelig forskning.

Den vigtigste opgave for immunoglobulin A (IgA) er de beskyttende funktioner i slimhinderne i luftvejene, mave-tarmkanalen og urinvejen. Efter en akut sygdomsdebut er det umuligt at identificere dem. Disse beskyttelseskomplekser vises kun fra 2 uger efter sygdommens begyndelse, nogle gange senere. Størstedelen af immunoglobulin A koncentreres i slimhindevæv. Cirka 80%. Resten af antistofferne cirkulerer i blodet.

Hovedfunktionen er at neutralisere og ødelægge mikroorganismer. Efter at de akutte manifestationer af sygdommen er aftaget, begynder mængden af disse immunglobuliner at falde og forsvinder helt i op til 8 uger efter sygdommens begyndelse. Hvis IgA detekteres på et senere tidspunkt, indikerer dette kronisering af processen.

De vigtigste og første markører for den akutte fase af udviklingspatologien er klasse M immunoglobuliner (IgM). De findes ved den 5. dag, efter hvor ondskaben begyndte. Deres tilstedeværelse i blodet kan bestemmes i ca. 6 uger. Så begynder de hurtigt at forsvinde.

Den resterende immunrespons er kendetegnet ved tilstedeværelsen af immunoglobuliner af klasse G (IgG) i blodet. Udseendet af disse faktorer i blodet påvises cirka en måned efter sygdommens begyndelse. I fremtiden kan de bestemmes i mange måneder, år og endda hele livet ved at udføre en beskyttende funktion mod sygdommens tilbagefald (tilbagefald) og i nogle tilfælde gøre det umuligt for den sekundære udvikling af patologi.

Hvis mængden af immunglobulin G begynder at stige igen, kan der antages en re-infektion. En lignende konklusion kan gøres ved at udføre to eller tre test foretaget med et interval på 2 uger.

Immunoglobulin E (IgE) bruges i praktiseringen af parasitologi Immunoglobulin D (IgD) findes på B-lymfocytter og findes i lave koncentrationer hos raske mennesker. Efter 10 års liv når det sine maksimale værdier. Mængden af immunglobulin D stiger under graviditet hos patienter med systemiske bindevævssygdomme, bronkial astma og sygdomme forårsaget af en immunsvigtstilstand.

Hvordan udføres ELISA-blod?

Til enzymimmunoanalyse anvendes i de fleste tilfælde blod fra patienter, undertiden tages det glasagtige væv, væske i rygmarven og fostervand.

Blod trækkes gennem en injektionsnål ind i en sprøjte fra kubitalvenen. Undersøgelsen udføres på tom mave. Det skal huskes, at indtagelse af visse medicin kan påvirke testresultatet. Før du donerer blod, skal du afstå fra at ryge, drikke alkohol. Indtagelse af narkotiske stoffer kan fordreje resultaterne.

I tilfælde af negative værdier af immunoglobuliner IgM, IgG, IgA, kan vi tale om fraværet af sygdommen eller dens indledende fase, og resultatet med minuser er muligt med en fuldstændig bedring efter en betydelig tidsperiode.

Hvis IgA og IgM ikke detekteres, og IgG manifesterer sig positivt, taler vi sandsynligvis om den dannede immunitet efter en infektiøs sygdom eller efter vaccination.

Hvis IgA og IgM ikke påvises, og IgG manifesterer sig positivt, så taler vi sandsynligvis om den dannede immunitet efter en infektiøs sygdom eller efter vaccination

I tilfælde af en høj titer af IgM med negative værdier af IgG, IgA, kan det konkluderes, at der er en akut infektiøs sygdom.

Samtidige positive værdier af resultaterne af immunoglobuliner - IgA, IgM, IgG er karakteristiske for den akutte fase af gentagelse af den eksisterende kroniske sygdom.

For en kronisk infektion i afslutningen af processen (remission) viser ELISA negative værdier af immunoglobulin M (IgM), mens resultatet af immunoglobuliner G (IgG) og A (IgA) vil være positivt.

Immunoassay for parasitter af ELISA

ELISA er en forkortelse for enzymbundet immunosorbentassay for parasitter. Det indebærer medicinsk test af en persons immunsystem. Testen er baseret på antistoffers evne til at ændre deres farve. Denne diagnostiske metode har mange positive egenskaber. For eksempel er han i stand til at opdage en lang række sygdomme forårsaget af infektion. Det er mest effektivt i tilfælde af sygdomme forårsaget af parasitære organismer.

Hvad den præsenterede teknologi giver: bestemmelse af tilstedeværelsen af helminths i blod; på udkig efter andre patogener i kroppen; du kan finde ud af årsagerne til forværringen af dit helbred; behandlingen er også baseret på analyser opnået på denne måde; du kan overvåge dit immunforsvars sundhed.

En anden god egenskab er evnen til at spore kræftmarkører, uanset deres oprindelse, men selvfølgelig underlagt deres tilstedeværelse i kroppen. Denne test er også velegnet til at beskrive tilstanden af det menneskelige reproduktive system. Tilstedeværelsen af visse proteiner, hormoner og peptider gør det muligt at bedømme partnerens potentiale med hensyn til at blive gravid, samt den anslåede kvalitet af det fremtidige foster.

En blodprøve for Giardia er en ret populær praksis blandt moderne læger. Derudover er denne forskningsmetode et fremragende værktøj til biomedicinsk analyse og kvantitativ statistik med hensyn til specifikke antigener.

Hvordan bruges ELISA-metoden?

Det ville være en stor fejltagelse at forveksle ELISA-metoden med metoden til sondering og efterfølgende undersøgelse af afføring. Sidstnævnte udføres ved anvendelse af metoder på mikroskopisk niveau, når der tages en afføringsprøve, der er givet af en patient, eller den udtages fra en potentiel patient direkte i en medicinsk institution. I prøven forsøger de at påvise helminthiske invasioner og andre komponenter, på en eller anden måde forbundet med parasiternes vitale aktivitet. Ikke kun mikroskopiske parasitorganismer undersøges, men også deres rester, deres æg og larver.

Tolkning af ELISA giver dig muligvis ikke en fuldstændig forståelse af problemet, så det er bedst at konsultere en læge eller laboratorieassistent. Det er også en fejltagelse at tro, at denne metode kun er relevant, hvis helminths parasiterer i tarmen. Mange andre organer er også diagnosticeret - parasitter kan leve i tolvfingertarmen, galdekanalen, leveren og endda i bugspytkirtlen.

Det er sandt, at dette er mere komplekse tilfælde, så kvaliteten af en sådan analyse afhænger i høj grad af arbejderne på laboratoriet, der udfører testen. Funktioner ved teknologien og dens forskel fra gammel laboratorieforskning:

i stedet for en afføringsprøve bruges blod til at bestemme tilstedeværelsen af helminths;
undersøgelsen af prøven udføres i laboratoriet meget hurtigt, den næste dag kan du få komplette oplysninger;
omkostningerne ved laboratorieforskning er billige, da teologien er meget enkel;
en blodprøve for helminths giver høj nøjagtighed.

Testresultaternes relevans og sandsynlighed er direkte proportional med kvalifikationerne for det medicinske personale, laboratoriets tekniske udstyr samt fraværet af uagtsomhed eller uopmærksomhed blandt lægerne. Selv den mest opmærksomme og ansvarlige laboratorieassistent vil imidlertid opleve enorme vanskeligheder, hvis parasitten er til stede i kroppen i dens minimale befolkning, eller hvis koblingen blev udført straks på testtidspunktet.

Immunologisk analyse af blod ved ELISA

Få mennesker ved, hvad blodprøver er fra det menneskelige immunologiske system, da disse test ikke er så almindelige. Som regel giver en sådan blodprøve information om immundefektvirus i den menneskelige krop og er anonym, da den udføres på anmodning af patienten.

Grundlæggende til ELISA-analyse er det biologiske materiale, der undersøges, blod, men cerebrospinalvæske, indholdet af glaslegemet, fostervand kan osv. Undersøges.

Til prøveudtagning bruges blod taget fra en blodåre på tom mave, hvorfra der opnås serum til undersøgelse ved centrifugering. Derudover kan undersøgelsen af blodserum afsløre en række seksuelt overførte sygdomme (syfilis, herpes, klamydia) samt alle typer hepatitis, mæslinger, røde hunde, fåresyge og toksoplasmose.

Grundlæggende til ELISA-analyse er det biologiske materiale, der undersøges, blod, men cerebrospinalvæske, indholdet af glaslegemet, fostervand kan osv. Undersøges.

Immunoglobuliner er immunmolekyler, der kan binde til og neutralisere de mest infektiøse patogener og toksiner i kroppen. I dette tilfælde er det vigtigste træk ved immunoglobuliner deres specificitet, det vil sige evnen til at binde til et specifikt antigen. Det er denne egenskab, der bruges til at gennemføre en blodprøve for immunoglobulin.

Der er fem typer immunoglobuliner, men de mest studerede er immunoglobuliner A, M og G. Immunoglobuliner M og G er aktive i blodet. Immunoglobuliner A er en slags barriere på overfladen af slimhinderne, da de er til stede der i store mængder.

En immunologisk blodprøve giver dig mulighed for at bestemme typen af immunglobuliner, takket være dette tillader ELISA ikke kun at diagnosticere sygdommen, men også bestemme stadiet i dette og spore sygdommens dynamik:

i de første 2 uger af sygdommen findes kun immunoglobuliner A;
fra 2. til 3. uge af sygdommen findes immunoglobuliner A og M i blodet;
CC3 i 4 uger, en blodprøve for immunoglobulin bestemmes af alle tre typer;
under opsving forsvinder immunoglobuliner M i blodet, og mængden af A og G falder 2 til 4 gange;
i nærvær af en kronisk proces er immunoglobuliner G nødvendigvis til stede i blodet, immunoglobuliner M er fraværende, immunoglobuliner A kan være til stede eller fraværende.

Omfang af immunologisk blodprøve af ELISA

Diagnostik af virussygdomme: hepatitis, herpes, Epstein-Barr-virus, cytomegalovirus osv.
seksuelt overførte infektioner: klamydia, gonoré, Trichomonas, mycoplasma, ureaplasma;
syfilis; endokrinologi (bestemmelse af hormonniveauer);
tumormarkører (diagnostik af onkologiske sygdomme); immunologi (diagnostik af immundefekt);
allergologi (diagnose og behandling af allergier).

Serologisk blodprøve er en laboratorieprøvningsmetode, der bruges til at diagnosticere infektionssygdomme og bestemme stadiet i den infektiøse proces. Serologisk respons er baseret på interaktion mellem antistoffer og antigener.

Bestemmelse af antigener bruges til at bestemme slægten og arten af mikroorganismer. Denne forskningsmetode bruges i urologi og venereologi. Blod til en serologisk blodprøve udtages om morgenen på tom mave fra en blodåre.

Indikationer for udnævnelse og opdagede sygdomme efter ELISA-metode

Det vigtigste biomateriale til ELISA er blodserum: i laboratoriet udtages en blodprøve fra patienten fra en vene, hvorfra de formede elementer, der komplicerer analysen, fjernes yderligere. I nogle andre tilfælde anvendes cerebrospinalvæske, fostervand, udstødning af slimhinder osv. Til analyse.

For at undgå forvrængninger i resultaterne anbefales det at donere blod på tom mave, og to uger før undersøgelsen (hvis målet er at diagnosticere kroniske, latente infektionssygdomme), er det nødvendigt at stoppe med at tage antibiotika og antivirale lægemidler. Det er umuligt at dække den fulde liste over indikationer for ELISA.

De mest almindelige mål for analyse er:

diagnostik af akutte og kroniske infektionssygdomme: IgM og IgG til viral hepatitis A, B, C, E såvel som hepatitis B og C antigener; IgG til HIV; Ig M og IgG til cytomegalovirusinfektion; Ig M og IgG til Epstein-Barr-virus; Ig M og IgG til herpesinfektioner; Ig M og IgG til toksoplasmose;
Ig M og IgG til mæslinger, røde hunde, salmonellose, dysenteri, tick-båret encephalitis og andre sygdomme; IgG til parasitiske sygdomme; Ig M og IgG til seksuelt overførte infektioner; IgG til Helicobacter pylori-infektion. Generel vurdering af indikatorer for human immunitet og markører af nogle autoimmune sygdomme. Identifikation af onkologiske markører (tumor nekrosefaktor, prostataspecifikt antigen, kræft-embryonalt antigen og andre). Bestemmelse af indholdet af hormoner i blodserumet (progesteron, prolactin, testosteron, skjoldbruskkirtelstimulerende hormon og andre).

Fordele ved ELISA-metoden

De udiskutable fordele ved ELISA er metodens høje følsomhed og specificitet. Følsomhed er evnen til at genkende målstoffet, selvom dets koncentration i prøven er lav. Specificitet på den anden side indebærer nøjagtigheden af diagnosen: hvis resultatet er positivt, betyder det, at præcist det antistof eller antigen, der blev antaget, blev fundet, og ikke nogle andre.

ELISA har stort set erstattet mikrobiologiens "guldstandard" - en bakteriologisk diagnostisk metode, hvor det for at identificere patogenet var nødvendigt at isolere det fra kroppen og derefter dyrke kulturen på et næringsmedium i et reagensglas i flere dage.

Mens analysen blev udført hele tiden, blev lægerne tvunget til at behandle patienten "blindt" og gætte om mikroorganismens oprindelse ved sygdommens symptomer. Bestemmelse af IgM ved hjælp af ELISA giver dig mulighed for at stille en nøjagtig diagnose allerede i de første dage af sygdommen.

Den høje grad af fremstillbarhed af enzymimmunoanalyse minimerer påvirkningen af den humane faktor, hvilket reducerer sandsynligheden for fejl. De fleste af ELISA testsæt og reagenser, der bruges i moderne laboratorier, er fremstillet i et industrielt miljø, hvilket garanterer et nøjagtigt resultat.

Ulemper ved ELISA-metoden

Desværre, for at udføre ELISA, skal du vide, hvad der præcist skal kigge efter: analyseteknikken indebærer, at lægen på forhånd har en antagelse om sygdommens art. Derfor giver det ingen mening at ordinere en sådan test i håb om at "gætte" diagnosen ved et uheld.

I tilfælde af diagnose af infektionssygdomme kan enzymet immunoassay ikke finde patogenet og bestemme dets specifikke egenskaber: det indikerer kun tilstedeværelsen af antistoffer i patientens blod, hvilket indirekte indikerer tilstedeværelsen af en fremmed mikroorganisme i den menneskelige krop. ELISA er en ekstremt nøjagtig, men ikke billig metode, så du skal bruge den med omhu, og en kvalificeret læge bør fortolke resultaterne.

Mulige ELISA-resultater

Afhængig af analysens indhold kan formen præsentere data i form af en tabel, der viser alle antistoffer eller antigener med bemærkninger om en negativ eller positiv reaktion, eller den kvantitative værdi af resultatet (negativ, svagt positiv, positiv eller skarpt positiv) vil blive angivet.

Den sidstnævnte mulighed bestemmer, hvor mange antistoffer der er indeholdt i den analyserede prøve. En anden kvantitativ indikator er antistofaviditetsindekset, udtrykt i procent. Det angiver, hvor meget tid der er gået siden begyndelsen af den infektiøse proces (jo højere indeks, desto mere).

I dag produceres tusinder af typer ELISA-testsystemer, der tillader påvisning af specifikke antistoffer og antigener i en lang række patologier. Derfor anvendes denne analyse i næsten alle medicinske industrier. Diagnosen stillet ved hjælp af ELISA er en garanti for udnævnelse af passende behandling og effektiv behandling af sygdommen.

Hvis du har de nødvendige reagenser og god organisering af laboratoriet, modtager du testresultatet inden for 1-2 dage efter blodopsamling. I nogle tilfælde, hvis der er behov for en nødsituation, kan denne periode reduceres til 2-3 timer.

Resultatet af en højkvalitets ELISA vil være en entydig dom: det ønskede stof findes enten eller findes ikke i prøven. Hvis vi taler om kvantitativ analyse, kan koncentrationen udtrykkes som en numerisk værdi eller et vist antal "+" tegn (fra en til flere).

Find ud af mere: